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設計建造PCR實(shí)驗室 WOL

更新時(shí)間:2025-04-22

簡(jiǎn)要描述:

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建造PCR實(shí)驗室——設計建造PCR實(shí)驗室 WOL

1、建立樣品準備區

這個(gè)區域專(zhuān)門(mén)用作樣品的準備,在制備和操作用于核酸提取的試劑時(shí)應該采取預防措施

2、樣品準備和RNA-PCR RNA-PCR的額外步驟需要額外的樣品操作,這樣增加了樣品之間污染的機會(huì )。為了避免這一問(wèn)題,反轉錄一步可以在樣品準備區進(jìn)行。在RNA-PCR中應用UNG以防止污染的方法也有報道。

3、建立前PCR區。

該去專(zhuān)門(mén)用于準備各種反應,這個(gè)區域必須保持干凈,而且沒(méi)有來(lái)自克隆和樣品準備的污染。前PCR區必須要有試劑和準備,特別是專(zhuān)門(mén)用于前PCR區的正壓活塞式移液管。

4、PCR實(shí)驗室試劑的操作。

5、在前PCR區建立PCR混合物。

6、控制污染的方法。

已設計出很有力的酶學(xué)方法用來(lái)消除一種形式的污染-使用UNG,這一技術(shù)能有效地消除由PCR產(chǎn)物引起的污染。另一種控制污染的方法是使用紫外線(xiàn),這種方法不能完*消除污染問(wèn)題,但可以將污染降低幾個(gè)數量級。

7、后PCR區PCR完成以后,需要分析樣品并解釋數據,應該留出一個(gè)專(zhuān)門(mén)用于反應后處理樣品的地方。后PCR活動(dòng)中使用的所用試劑、一次性耗材和儀器都必須是專(zhuān)門(mén)用于這一目的,決不能把實(shí)驗室這一區域的試劑或儀器用于任何前PCR活動(dòng)


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